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艾本德(Eppendorf)Research plus 系列移液器是精密儀器,定期校準(zhǔn)對保證移液準(zhǔn)確性至關(guān)重要。其校準(zhǔn)分為兩個主要部分:機械校準(zhǔn)和性能驗證。
一、艾本德Research plus八道移液器重要提示
1、建議:對于高精度要求或認證實驗室(如ISO/GMP),建議將移液器送至艾本德服務(wù)中心或由經(jīng)過培訓(xùn)的專業(yè)人員進行校準(zhǔn)。
2、自行操作:如果您具備經(jīng)驗并擁有必要設(shè)備,可進行日常的“用戶校準(zhǔn)"或“現(xiàn)場核查"。以下步驟基于手冊和通用標(biāo)準(zhǔn)。
3、工具準(zhǔn)備:分析天平(精度需達0.01mg,用于小體積)、稱量皿、去離子水、溫度計、濕度計、無絨布。
二、艾本德Research plus八道移液器詳細步驟分解
1、準(zhǔn)備工作
(1)環(huán)境穩(wěn)定:在無風(fēng)、無震動的穩(wěn)定臺面上進行。記錄室溫和濕度(理想條件:20-25°C,50-70%相對濕度)。
(2)清潔移液器:用蘸有70%乙醇的無絨布擦拭移液器外表面,特別是吸頭圓錐部分。確保活塞運動順暢。
(3)準(zhǔn)備測試液體:使用高純度去離子水。記錄水溫,通過《水密度表》查找該溫度下水的密度(Z因子)。
(4)預(yù)潤濕吸頭:使用原裝或高質(zhì)量吸頭。在正式測試前,對同一體積的液體進行3-5次抽吸排放操作,使吸頭內(nèi)壁形成穩(wěn)定的氣溶膠環(huán)境。
(5)天平準(zhǔn)備:將稱量皿放在天平上,穩(wěn)定后去皮歸零。
2、性能測試(四點測試法)
這是驗證移液器精密度和準(zhǔn)確度的關(guān)鍵。
(1)選擇測試點:通常選取移液器量程的最小體積、中間體積、MAX體積,以及一個常用工作體積。
(2)測試方法(以100μL為例):
將移液器設(shè)定至目標(biāo)體積(如100μL)。
安裝新吸頭,吸取去離子水。
將液體垂直、緩慢地排入稱量皿底部,等待約1秒后,吸頭頂部輕觸液面以移去掛滴。
記錄天平顯示的質(zhì)量值(mg)。去皮歸零,準(zhǔn)備下一次稱量。
(3)重復(fù)此操作10次,記錄10個質(zhì)量讀數(shù)。
3、數(shù)據(jù)處理:
(1)計算平均值:Avg = (M1+M2+…+M10)/10
(2)計算實際體積:V_actual (μL) = Avg (mg) / Z_factor (mg/μL)
(3)計算準(zhǔn)確度(系統(tǒng)差):Inaccuracy % = [(V_actual - V_set) / V_set] × 100%
(4)計算精密度(隨機差):Imprecision % = [標(biāo)準(zhǔn)偏差SD / V_actual] × 100%
4、結(jié)果判定:對照艾本德Research plus的技術(shù)規(guī)格(通常為 ±0.1-0.7% 準(zhǔn)確度差,≤0.07-0.2% 精密度差,取決于體積)。常用寬松標(biāo)準(zhǔn)是差在±1%以內(nèi)為優(yōu)秀,±2%以內(nèi)為可接受。 如果超出范圍,則需進行機械調(diào)整。
三、機械調(diào)整
如果測試不合格,則需調(diào)節(jié)內(nèi)部校準(zhǔn)旋鈕。
1、確認型號:確保您的Research plus移液器具有可調(diào)校準(zhǔn)功能(查看說明書或觀察底部是否有小窗蓋)。
2、打開調(diào)節(jié)窗:找到移液器手柄底部的圓形小窗蓋。使用專用工具(通常隨移液器附帶)或小號一字螺絲刀,逆時針旋轉(zhuǎn)并取下窗蓋。
3、調(diào)節(jié)校準(zhǔn)旋鈕:
(1)窗蓋內(nèi)有一個六角形校準(zhǔn)旋鈕。
(2)使用艾本德專用校準(zhǔn)工具或合適尺寸的六角扳手進行微調(diào)。
(3)調(diào)節(jié)方向口訣:
“順大逆小" 或 “順加逆減"
如果實測體積 小于 設(shè)定體積(負偏差),需要增大出液量。將六角扳手順時針旋轉(zhuǎn)(通常1小格對應(yīng)約0.2-0.5%的體積變化)。
如果實測體積 大于 設(shè)定體積(正偏差),需要減小出液量。將六角扳手逆時針旋轉(zhuǎn)。
(4)重要:每次只進行微小的調(diào)整(如1/8圈),然后蓋上窗蓋,重復(fù)第二步的性能測試。切勿一次性大幅度旋轉(zhuǎn)。
(5)鎖定并關(guān)閉:調(diào)整至合格后,確保旋鈕穩(wěn)定,然后將窗蓋裝回并順時針擰緊。
(6)調(diào)整Volume Limit(如需要):Research plus頂部還有一個“Volume Limit"調(diào)節(jié)螺絲,用于設(shè)定MAX和最小體積的機械限位。非專業(yè)人員請勿輕易調(diào)整此螺絲,錯誤的調(diào)整可能導(dǎo)致活塞卡死或量程超限。通常只需調(diào)整底部的CALIBRATION旋鈕。
四、驗證與記錄
1、重復(fù)測試:在調(diào)整后,必須重新進行完整的四點測試(至少包括最小、MAX和常用體積),確保所有測試點均在允許差范圍內(nèi)。
2、標(biāo)簽與記錄:
在校準(zhǔn)合格的移液器上粘貼狀態(tài)標(biāo)簽,注明校準(zhǔn)日期、下次校準(zhǔn)日期、操作人。
詳細填寫校準(zhǔn)記錄表,包括:儀器編號、測試體積、設(shè)定值、實測值、差%、環(huán)境溫濕度、結(jié)論等。
3、清潔收納:將移液器調(diào)至MAX量程,清潔后妥善存放。