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賽默飛（Thermo Scientific）NanoDrop One/OneC 微量紫外-可見分光光度計的技術(shù)使用說明，涵蓋儀器操作、測量步驟、注意事項及維護要點：
一、賽默飛NanoDrop One C儀器簡介
NanoDrop OneC 是一款用于微量樣本（0.5-2 μL）的紫外-可見分光光度計，無需比色皿，直接測量核酸、蛋白質(zhì)、細胞培養(yǎng)物等的濃度和純度（如A260/A280比值）。
核心功能：
檢測核酸（DNA/RNA）、蛋白質(zhì)（Bradford/Lowry/BCA法）、細胞密度（OD600）等。
波長范圍：190-850 nm（紫外-可見光）。
樣本體積：0.5-2 μL（無需稀釋）。
二、操作步驟
1、開機與初始化
開機：連接電源，按下儀器正面電源鍵，啟動配套軟件（NanoDrop One）。
初始化：
打開軟件后，儀器自動進行光源校準和基線校正（約1分鐘）。
確保測量 pedestal（檢測臂）清潔無殘留（用無塵紙蘸蒸餾水擦拭）。
2、選擇檢測模式
在軟件界面選擇檢測類型：
核酸（Nucleic Acid）：DNA/RNA濃度（A260）及純度（A260/A280、A260/A230）。
蛋白質(zhì)（Protein）：A280或其他波長（如Bradford法測595 nm）。
其他應(yīng)用（如OD600、用戶自定義波長）。
3、空白校正
抬起檢測臂，在上下 pedestal 各加1-2 μL空白溶液（如蒸餾水、緩沖液）。
放下檢測臂，點擊軟件中的“Blank"按鈕，完成基線校正。
4、樣本測量
抬起檢測臂，用無塵紙清潔 pedestal。
加1-2 μL樣本至下 pedestal（避免氣泡），放下檢測臂。
點擊“Measure"讀取數(shù)據(jù)，軟件自動顯示濃度、吸光度和比值。
測量后立即清潔 pedestal，防止交叉污染。
5、數(shù)據(jù)保存與導(dǎo)出
數(shù)據(jù)自動保存至軟件，可導(dǎo)出為Excel/CSV格式。
支持生成報告（PDF）或直接打印。
三、關(guān)鍵注意事項
1、樣本要求：
樣本需透明、無顆粒（避免散射光干擾）。
高濃度樣本可能導(dǎo)致信號飽和（DNA/RNA > 3700 ng/μL時需稀釋）。
2、清潔維護：
每次測量前后用無塵紙蘸蒸餾水或70%乙醇清潔 pedestal。
避免使用丙酮等腐蝕性溶劑。
3、校準與質(zhì)控：
定期使用NIST標準參考物質(zhì)（如SRM 2082）驗證準確性。
若基線漂移，重新執(zhí)行空白校正。
4、常見問題：
誤差來源：樣本殘留、氣泡、 pedestal 污染。
A260/A280異常：蛋白質(zhì)污染（比值<1.8）或苯酚殘留（比值>2.0）。
NanoDrop OneC 通過微量樣本快速檢測，適用于實驗室常規(guī)濃度分析。操作時需嚴格注意清潔和校準，以確保數(shù)據(jù)準確性。對于高通量需求，可搭配自動化模塊（如8聯(lián)板適配器）。
