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做PCR實驗的話需要哪種儀器和試劑耗材?

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PCR(聚合酶鏈式反應(yīng))實驗室需要配備多種儀器設(shè)備以及相應(yīng)的耗材,以下為你詳細介紹:


一、儀器設(shè)備

1、PCR 擴增儀:這是核心儀器,能夠?qū)崿F(xiàn)對特定 DNA 片段的體外擴增,通過控制溫度循環(huán)來完成變性、退火、延伸等步驟,從而大量復(fù)制目標 DNA 片段。

2、核酸提取儀:用于從生物樣本(如血液、組織、痰液等)中提取核酸(DNA 或 RNA),實現(xiàn)自動化或半自動化的提取操作,提高提取效率和純度。

3、提取儀在處理具有潛在生物危害的樣本(如病毒樣本等)時,可有效保護操作人員、樣本以及環(huán)境,避免樣本受到污染以及防止有害氣溶膠等擴散。

4、離心機:可對樣本進行離心處理,比如將血液樣本離心分層,便于后續(xù)提取核酸等操作,有臺式、落地式等多種類型,轉(zhuǎn)速等參數(shù)各有不同。

5、移液器:用于精確量取不同體積的液體試劑,如吸取核酸提取試劑、PCR 反應(yīng)體系的各種緩沖液、引物、模板等,有單通道、多通道等不同規(guī)格,可滿足不同的移液需求。

6、超凈工作臺:為實驗操作提供局部的無菌潔凈環(huán)境,適用于一些對無菌要求較高的試劑配制等前期準備工作。

7、冰箱(普通冰箱、超低溫冰箱、低溫冰柜):普通冰箱(2 - 8℃)可用于存放一些常規(guī)的試劑、酶等,需要低溫保存但要求不是極低溫度的物品;超低溫冰箱(-80℃及以下)用于長期保存珍貴的樣本、酶類等對溫度極為敏感的材料;低溫冰柜(-20℃左右)可存放一些如核酸提取物等需要低溫但對溫度要求稍低于超低溫冰箱的物品。

8、恒溫培養(yǎng)箱:可用于培養(yǎng)一些微生物等,在涉及到檢測樣本中微生物相關(guān)情況或者驗證實驗條件等場景下會用到,能夠精準控制溫度,保證培養(yǎng)環(huán)境穩(wěn)定。

9、凝膠成像系統(tǒng):在進行核酸電泳后,用來觀察和分析電泳結(jié)果,比如檢測 PCR 產(chǎn)物的大小、條帶情況等,通過成像并分析圖像判斷實驗結(jié)果是否符合預(yù)期。

10、電泳儀及電泳槽:用于對核酸進行電泳操作,通過電場作用使核酸在凝膠中按分子量大小等特性進行分離,輔助判斷核酸的質(zhì)量、大小等情況。


二、耗材

1、PCR 管:作為 PCR 反應(yīng)的容器,通常為薄壁管,有 0.2ml、0.5ml 等不同規(guī)格,要保證良好的熱傳導(dǎo)性,以確保 PCR 反應(yīng)時溫度變化能迅速均勻傳遞。

2、槍頭(移液器吸頭):與移液器配合使用,有不同規(guī)格,如 10μl、200μl、1000μl 等,需要保證其精度以及良好的適配性,而且一般要經(jīng)過無菌處理。

3、離心管:用于離心操作時盛放樣本或試劑等,材質(zhì)多樣,常見的有塑料材質(zhì),有不同的容量規(guī)格可供選擇,像 1.5ml、5ml、15ml 等。

4、一次性手套:保護操作人員雙手,避免接觸樣本、試劑受到污染以及防止生物危害,通常為乳膠手套或丁腈手套等。

5、一次性口罩:防止操作人員吸入氣溶膠等有害物質(zhì),保障實驗操作環(huán)境的生物安全。

6、核酸提取試劑盒:不同樣本類型往往有對應(yīng)的提取試劑盒,里面包含了提取核酸所需的各種試劑,按照說明書操作能較高效地提取出合格的核酸。

7、PCR 反應(yīng)試劑盒:包含了 PCR 反應(yīng)所需的 DNA 聚合酶、緩沖液、dNTPs 等成分,為 PCR 擴增提供必要的反應(yīng)體系組成物質(zhì)。

8、瓊脂糖:用于制備瓊脂糖凝膠,是核酸電泳時常用的凝膠基質(zhì),根據(jù)不同的實驗需求選擇不同純度、濃度的瓊脂糖。

9、核酸染料:在電泳后便于觀察核酸條帶,可使核酸在紫外光下呈現(xiàn)出清晰的熒光條帶,比如常用的溴化乙錠(但因其有一定毒性,使用時需謹慎并規(guī)范處理)、熒光染料等。


此外,根據(jù)具體開展的實驗項目以及實驗室的實際需求,還可能會配備如渦旋振蕩器、金屬浴、制冰機等其他儀器設(shè)備以及相應(yīng)的其他耗材。

TEL:18016231680

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